多重免疫組化技術（mIHC）近兩年發(fā)展迅速，已經(jīng)展示出強大的臨床轉(zhuǎn)化能力，解決了在同一張切片上進行多種生物標志物檢測及共定位的難題。
mIHC在一張組織樣本上復染多種分子標記，將多元信息呈現(xiàn)在同一畫面內(nèi)，配合特定軟件進行全面分析，原位評估免疫細胞表型，獲得各靶標數(shù)量、密度、百分比等數(shù)據(jù)，探尋組織微環(huán)境中的目標分子或不同類群細胞間的相互關系。這對于研究疾病的發(fā)生發(fā)展轉(zhuǎn)移機制，探討疾病診斷和治療具有重要意義。
Principle
TSA技術（Tyramide Signal Amplification，酪胺信號放大）利用辣根過氧化酶（HRP）對靶蛋白進行高密度原位標記，提高檢測的靈敏度，大幅提高信噪比。TSA信號不受微波法影響，并能在抗體去除后保留信號，同時由于共價鍵結合方式，熒光探針結合穩(wěn)定。在微波法處理后，即可進行下一輪染色檢測，無需擔心上一輪染色中抗體的干擾。因此，TSA技術可以使用同一種屬來源的一抗進行多色標記，每一輪染色換用不同熒光標記，對組織切片樣本多重染色。
Advantages
免疫學的基本原理決定了抗原與抗體之間的結合具有高度特異性
在應用免疫組化的起始階段，由于技術上的限制，只有直接法、間接法等靈敏度不高的技術，當時抗體只能稀釋幾倍至幾十倍；現(xiàn)在由于TSA信號放大功能，利用少量抗體仍可在細胞中與抗原結合，超高靈敏度的抗原抗體反應使得多重免疫組化方法越來越多的應用到病理診斷工作中
該技術通過抗原抗體反應和呈色反應，可在組織和細胞中進行抗原的準確定位，可同時對不同抗原在同一組織或細胞中進行定位觀察，這樣就可以進行形態(tài)與功能相結合的研究，對病理學的深入研究具有十分重要的意義
同一組織可選用多種不同組合的生物標志物，為臨床研究提供多種選擇方案
Process
